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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題：SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測外源蛋白的表達
[實驗原理]SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS—PAGE）是蛋白分析中zui經(jīng)常使用的一種方法。它是將蛋白樣品同離子型去垢劑十二烷基硫酸鈉（SDS）以及巰基乙醇一起加熱，使蛋白變性，多肽鏈內(nèi)部的和肽鏈...
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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題：聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度
（一）原理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制，因此可以形成“連續(xù)系統(tǒng)”和“不連續(xù)系統(tǒng)”兩種電泳系統(tǒng)?！安贿B續(xù)系統(tǒng)”zui大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是：（1）使用兩種...
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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題：蛋白質(zhì)抽取
蛋白質(zhì)在細菌中表現(xiàn)后，以反復的冷凍-解凍方法打破細胞，再用硫酸銨把蛋白質(zhì)沉淀下來，此步驟可以去除大部份核酸、多醣、脂質(zhì)等雜物。儀器用具：恒溫震蕩培養(yǎng)箱37℃；高速冷凍離心機及離心管（使用20,000r...
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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題：folin—酚試劑法（lowry法）測蛋白質(zhì)含量
一、實驗原理這種蛋白質(zhì)測定法是zui靈敏的方法之一。過去此法是應(yīng)用zui廣泛的一種方法，由于其試劑乙的配制較為困難（現(xiàn)在已可以訂購），近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的...
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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題：PPO粗酶液的純化
一、原理1.葡聚糖凝膠SephadexG-200凝膠柱層析利用大分子不能進入凝膠顆粒內(nèi)部zui先流出柱外，而小分子物質(zhì)進入凝膠顆粒內(nèi)部，流速慢而zui后流出柱外，凝膠層析法能將不同分子大小的物質(zhì)分離開...
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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題：蛋白質(zhì)測序
一、概念當前，所謂蛋白質(zhì)測序，主要指的是蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)的測定。蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)（Primarystructure）包括組成蛋白質(zhì)的多肽鏈數(shù)目。很多場合多肽和蛋白質(zhì)可以等同使用。多肽鏈的氨基酸順序，它...
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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題：免疫球蛋白提取技術(shù)
免疫球蛋白（ImmunoglobulinIg）的含量代表著機體體液免疫的水平，并進一步代表著B細胞的功能，因此測定血清Ig含量可以推知機體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。隨著免疫學...