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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題:蛋白質(zhì)的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗
[原理]蛋白質(zhì)在十二烷基硫酸鈉(SDS)和巰基乙醇的作用下,分子中的二硫鍵還原,氫鍵等打開,形成按1.4gSDS/1g蛋白質(zhì)比例的SDS-蛋白質(zhì)多肽復(fù)合物,該復(fù)合物帶負電,故可在聚丙烯酰胺凝膠電泳中向...
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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題:蛋白質(zhì)純化膠體過濾法
不同大小的蛋白質(zhì)分子進入膠體過濾管柱,可依其分子量差異分離;是一種廣泛應(yīng)用的partition色析法(Pharmacia操作手冊,GelFiltration)。儀器設(shè)備:色析管柱(PharmaciaC...
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2013-11
蛋白質(zhì)技術(shù)專題:液相色譜之反相液相色譜
反相色譜(reversedphascchromatography,RPC)是基于溶質(zhì)、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應(yīng)建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結(jié)構(gòu)中都有非極性的疏水部分,這部分越...
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2013-11
蛋白質(zhì)技術(shù)專題:蛋白標準品(Marker)知識匯總
相關(guān)專題蛋白Marker可分為:一、未預(yù)染的Marker即寬分子量蛋白標準、高分子量蛋白標準以及低分子量蛋白標準;二、預(yù)染的Marker即單色預(yù)染和多色預(yù)染。在westernblot過程中,分子量Ma...
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2013-11
蛋白質(zhì)技術(shù)專題:重組DNA技術(shù)與基因工程(組圖)
重組DNA技術(shù)是現(xiàn)代分子生物技術(shù)發(fā)展中zui重要的成就之一。即是基因工程(GeneEngineering)的核心技術(shù)。重組DNA技術(shù)(RecombinantDNATechnique)是人類根據(jù)需要選擇...
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2013-11
蛋白質(zhì)技術(shù)專題:凝膠層析法脫鹽和分離蛋白質(zhì)
(一)原理凡鹽析所獲得的粗制蛋白質(zhì)(鹽析得到的IgG)中均含有硫酸銨等鹽類,這類將影響以后的純化,所以純化前均應(yīng)除去,此過程稱為“脫鹽”(desalthing)。脫鹽常用透析法和凝膠過濾法,這兩種方法...
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2013-11
蛋白質(zhì)技術(shù)專題:蛋白質(zhì)凝膠電泳凝膠的制備
【材料與試劑】(1)30%的丙烯酰胺:分別稱取29g丙烯酰胺,1gN,N-亞甲雙丙烯酰胺加溫熱的去離子水60ml,加熱至37℃溶解,補加水至終體積為100ml,過濾,即配成30%(w/v)丙烯酰胺貯存...