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2013-11
PCR技術(shù)專題：免疫PCR系列三-基本實驗步驟
主要程序（1）抗原+生物素化抗體→抗原-生物素化抗體復(fù)合物；（2）加親合素→抗原-生物素化抗體-親合素復(fù)合物；（3）加生物素化DNA→抗原-生物素化抗體-親合素-生物素化DNA；（4）PCR擴(kuò)增生物素...
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2013-11
PCR技術(shù)專題：PCR擴(kuò)增分離目的DNA段實驗原理、材料和步驟
一、目的了解多聚合酶鏈反應(yīng)DNA擴(kuò)增技術(shù)的基本原理和實驗應(yīng)用，掌握PCR反應(yīng)基本技術(shù)。二、原理PCR（PolymeraseChainReaction）即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是1986年由KallisMull...
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2013-11
PCR技術(shù)專題：PCR產(chǎn)物的克隆
PCR產(chǎn)物克隆大致分為兩類，即平頭連接和粘頭連接。平頭連接是將制備好的平頭載體和補(bǔ)平或削平的PCR產(chǎn)物直接進(jìn)行連接。載體可用EcoRV或SmaI切成平頭；PCR產(chǎn)物純化后，可以在22℃用DNA聚合酶I...
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2013-11
PCR技術(shù)專題：反向PCR （inverse-PCR）實驗步驟
inverse-PCR是克隆插入片段側(cè)翼序列非常有效的方法。通常采用的Tail-PCR假陽性太多，而Inverse-PCR一般只要有特異條帶，基本上就是目的片段?；静襟E如下：1、反向PCR（Inve...
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2013-11
PCR技術(shù)專題：菌落PCR
菌落PCR標(biāo)簽：菌落PCR菌落PCR（ColonyPCR）可不必提取基因組DNA，不必酶切鑒定，而是直接以菌體熱解后暴露的DNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，省時少力。建議使用載體上的通用引物。通常利用此方法...
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2013-11
PCR技術(shù)專題：巢式PCR
巢式PCR標(biāo)簽：巢式PCR巢式PCR是一種變異的聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），使用兩對（而非一對）PCR引物擴(kuò)增完整的片段。*對PCR引物擴(kuò)增片段和普通PCR相似。第二對引物稱為巢式引物（因為他們在*次PC...
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2013-11
PCR技術(shù)專題：限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）分析
本實驗將應(yīng)用RFLP分析技術(shù)檢測NMDA受體中的GRIN2A亞基基因3號內(nèi)含子中的2個SNP位點rs17750303（A→C）和rs837690（A→G）。[實驗原理]DNA限制性內(nèi)切酶具有識別特定的...