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2013-11
PCR技術專題：PCR法檢測乙肝病毒（HBV）
PCR方法操作簡便，靈敏度高，可檢測出少至0.1pg的目的DNA。目前已廣泛應用于多種病原微生物的檢測。乙肝病毒（HBV）感染引起的乙型肝炎，在我國發(fā)病率很高，而且HBV與肝硬化、原發(fā)性肝癌關系密切，...
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2013-11
PCR技術專題：分子標記——AFLP原理和操作步驟
一、原理AFLP也是通過限制性內(nèi)切酶片段的不同長度檢測DNA多態(tài)性的一種DNA分子標記技術。但AFLP是通過PCR反應先把酶切片段擴增，然后把擴增的酶切片段在高分辨率的順序分析膠上進行電泳，多態(tài)性即以...
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2013-11
PCR技術專題：PCR-SSCP 技術實驗
實驗原理聚合酶鏈式反應-單鏈構(gòu)象多態(tài)（PolymeraseChainReaction-SingleStrandConformationPolymorphism，PCR-SSCP）技術是在PCR技術基礎...
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2013-11
PCR技術專題：直接原位PCR（In situ PCR）
原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結(jié)合的技術，使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對靶基因片段進行擴增，通過摻入標記基團直接顯色...
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2013-11
PCR技術專題：實時熒光定量PCR具體實驗步驟
1樣品RNA的抽提①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。②兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的氯仿，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。...
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2013-11
PCR技術專題：聚合酶鏈式反應（PCR）擴增和擴增產(chǎn)物克隆
PCR（PolymeraseChainReaction，聚合酶鏈反應）是一種選擇性體外擴增DNA或RNA的方法.它包括三個基本步驟：（1）變性（Denature）：目的雙鏈DNA段在94℃下解鏈；（2...
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2013-11
PCR技術專題：逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應實驗方法
逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應（ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction，RT-PCR）的原理是：提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用Oli...