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2013-10
細(xì)胞轉(zhuǎn)染：脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的幾個(gè)實(shí)驗(yàn)方法
摘要：本實(shí)驗(yàn)介紹了脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的幾個(gè)方法。實(shí)驗(yàn)原理脂質(zhì)體（LR）試劑是陽(yáng)離子脂質(zhì)體DOTMA和DOPE的混合物（1：1）。它適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中，是目前條件下zui方面的轉(zhuǎn)染方法之一...
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細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)和掌握外源基因?qū)胝婧思?xì)胞的主要方法——脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染。了解外源基因進(jìn)入的一般性方法，觀測(cè)外源蛋白的表達(dá)（綠色熒光蛋白），為染色準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料。二、實(shí)驗(yàn)原理上圖所示是脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染的示...
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感受態(tài)制備：大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備、重組DNA的轉(zhuǎn)化、克隆篩選
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵笸ㄟ^(guò)本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)氯化鈣法制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞和外源質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)入受體菌細(xì)胞的技術(shù)以及篩選轉(zhuǎn)化體的技術(shù)。了解細(xì)胞轉(zhuǎn)化的概念及其在分子生物學(xué)研究中的意義。2.相關(guān)知識(shí)及原理感受態(tài)細(xì)胞（C...
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RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：核糖核酸酶保護(hù)分析
一、體外轉(zhuǎn)錄在無(wú)菌1.5ml微型離心管中，結(jié)合以下內(nèi)容：4ul5倍轉(zhuǎn)錄緩沖液2ul0.1MDTT4ul2.5MMNTP（A，C，G）0.8ulRNA酶抑制劑（25U/ul）RNA酶抑制劑（Promeg...
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RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：細(xì)胞質(zhì)RNA提取實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽：細(xì)胞質(zhì)RNA由于RNA的種類來(lái)源很多，因而提取制備方法各異，一般有苯酚法，去污劑法和鹽酸胍法，其中苯酚法實(shí)驗(yàn)室zui常用。組織勻漿后用苯酚處理離心，RNA即溶于上層被酚飽和的水相中，向水相加冷乙...
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RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：Northern blot實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽：NorthernblotNorthernblot是一種通過(guò)檢測(cè)RNA的表達(dá)水平來(lái)檢測(cè)基因表達(dá)的方法，通過(guò)northernblot的方法可以檢測(cè)到細(xì)胞在生長(zhǎng)發(fā)育特定階段或者脅迫或病理環(huán)境下特定基因...
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RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)原理、材料和操作步驟
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)RNA瓊脂糖凝膠電泳的使用技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)原理RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)。在非變性電泳中，可以分離混合物中不同分子量的RNA分子，凡是無(wú)法確定分子量。只有在變性情況下，R...