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2015-5
Omega質(zhì)粒小量提取流程
實(shí)驗(yàn)試劑1.使用前,將RNaseA全部加入SolutionI中并于4度保存。2.按下表用無水乙醇稀釋DNAWashBuffer,并于室溫保存。D6948-00B:加入8ml無水乙醇D6948-01B:...
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2015-5
細(xì)菌中蛋白質(zhì)的提取與純化技術(shù)
實(shí)驗(yàn)試劑采用T7?TagAffinityPurificationKitT7?Tag抗體瓊脂。B/W緩沖液:4.29mMNa2HPO4,1.47mMKH2PO4,2.7mMKCl,0.137mMNaCl...
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2015-5
從瓊脂糖凝膠(Agaros gel)中回收DNA片段
實(shí)驗(yàn)原理限制性內(nèi)切酶切割后的DNA片斷經(jīng)過電泳后,按分子量大小被分開,排列在瓊脂糖凝膠中,可以將特定的某條DNA帶所在的凝膠切下來,加熱或用特殊的試劑熔解凝膠,使DNA溶回到溶液中,再經(jīng)過乙醇沉淀或過...
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2015-5
蛋白質(zhì)濃度測(cè)定(雙縮脲法)
實(shí)驗(yàn)原理測(cè)定蛋白質(zhì)的定量方法有很多,目前常用的有凱氏定氮法;比色法主要包括雙縮脲法、Folin-酚試劑法及染料結(jié)合法;紫外分光光度法等雙縮脲(Biuret)法:在堿性溶液中,雙縮脲(H2N—CO—NH...
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微生物生物量和生長曲線的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)原理我們知道微生物都具有生長旺、繁殖快的特點(diǎn),單細(xì)胞微生物如細(xì)菌、酵母菌的個(gè)體細(xì)胞的增大即細(xì)胞物質(zhì)的增加是有限度的,細(xì)胞長大到一定程度就開始分裂繁殖,菌體數(shù)量增多。細(xì)菌旺盛生長時(shí)幾十分鐘就可繁殖一...
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2015-5
EMSA凝膠遷移
實(shí)驗(yàn)原理凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA)是一種研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用的技術(shù),可用于定性和定量分析。這一技術(shù)zui初用于研究DNA結(jié)合蛋白,目前已用于研究RNA結(jié)合蛋白和...
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LB培養(yǎng)基的配制
實(shí)驗(yàn)步驟1.LB培養(yǎng)基Tryptone10gYeastExtract5gNaCl10g加水至1000mL(pH7.2,固體培養(yǎng)基加1.8%瓊脂粉)。2.LB抗性篩選培養(yǎng)基待滅菌后的LB固體培養(yǎng)基溫度降...